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我國(guó)科研團(tuán)隊(duì)開發(fā)新一代多重?zé)晒庠浑s交技術(shù)


(資料圖片僅供參考)

2月12日,記者從華中農(nóng)業(yè)大學(xué)獲悉,該校曹罡教授、戴金霞副研究員團(tuán)隊(duì)日前在《自然溝通》雜志發(fā)表一項(xiàng)研究成果,研究開發(fā)了新一代熒光原位雜交方法—p-FISH rainbow,突破現(xiàn)有的技術(shù)壁壘,克服目前FISH (fluorescence in situ hybridization,即熒光原位雜交)領(lǐng)域的缺陷和不足,可精準(zhǔn)將不同生物(動(dòng)物、植物和病原微生物等)中多種生物分子(DNA、mRNA 、lncRNA、miRNA、rRNA、蛋白質(zhì)和小分子等)“一網(wǎng)打盡”。

華中農(nóng)大供圖

據(jù)介紹,近年來單細(xì)胞RNA測(cè)序促進(jìn)了細(xì)胞異質(zhì)性的解析,卻伴隨著組織微環(huán)境和細(xì)胞空間信息的缺失,限制了對(duì)生命信息的深度解讀。FISH技術(shù)通過特異性雜交解析生物分子的表達(dá)水平和空間位置,極大地促進(jìn)細(xì)胞中基因空間表達(dá)信息的探究,加速我們對(duì)組織微環(huán)境和功能機(jī)制的深入理解。

目前,F(xiàn)ISH技術(shù)不斷改進(jìn)已取得巨大進(jìn)步,但仍存在一些挑戰(zhàn),一定程度上限制了對(duì)短核酸序的檢測(cè),沒有有效方法同時(shí)檢測(cè)DNA、RNA和蛋白質(zhì)。此外,在實(shí)現(xiàn)高雜交效率和高信號(hào)強(qiáng)度的同時(shí),保證低背景噪音仍然是原位雜交技術(shù)的一個(gè)關(guān)鍵門檻。

針對(duì)這些難題,上述研究團(tuán)隊(duì)開發(fā)了雜交效率高、信號(hào)放大能力強(qiáng)、背景噪音低、特異性好、檢測(cè)通量高、應(yīng)用范圍廣的新型熒光原位雜交方法—π-FISH rainbow。該方法具備高度創(chuàng)新性和優(yōu)越性,且應(yīng)用范圍廣泛,可用于動(dòng)物、植物和微生物(細(xì)菌,病毒和寄生蟲等)樣品的檢測(cè),不拘泥于樣本制備限制,也適用于冰凍樣本、石蠟樣本和整體胚胎樣本的檢測(cè)。

同時(shí),該研究利用π-FISH rainbow方法探究了重要的生物學(xué)問題,并取得新發(fā)現(xiàn),成功鑒定前列腺癌患者循環(huán)腫瘤細(xì)胞中雄激素治療抵抗標(biāo)志物雄激素受體剪接變體7 (ARV7),解決了前列腺癌治療中缺乏精準(zhǔn)診斷的難題,為前列腺癌患者雄激素耐藥性治療提供重要臨床指導(dǎo)。

π-FISH rainbow具備高靈敏度,該研究首次發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞周期關(guān)鍵調(diào)控因子lncRNA?MALAT1具有三種不同的亞細(xì)胞定位模式。其中,MALAT1的核聚集模式顯示與miR145-5p的高度共定位。這些研究展現(xiàn)出π-FISH?rainbow技術(shù)在基礎(chǔ)科學(xué)研究和臨床診斷中的巨大應(yīng)用潛力,為生命科學(xué)研究和臨床診斷提供有力工具。

據(jù)悉,曹罡教授和戴金霞副研究員為該論文共同通訊作者,博士研究生陶影峰和周小六為共同第一作者。該研究得到國(guó)家自然科學(xué)基金、廣東省重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃、中央高?;究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金項(xiàng)目資助。

關(guān)鍵詞: 熒光原位雜交 前列腺癌 臨床診斷 副研究員 生物分子

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